Gepatit C - bir yoki bir nechta RNK molekulalaridan iborat Flaviviridae HCV virusi keltirib chiqaradigan jigar infektsiyasi. Qoidaga ko'ra, bemorda gepatit C ni aniqlash uchun bir qator diagnostika tadbirlari o'tkaziladi PCR - tashxisni aniq tasdiqlaydigan tahlil. Ko'pincha shifokorlar xulosani bemorda kasallikning birinchi belgilari bo'lganida berishadi.
Gepatit C nima
Jigarning qon yoki jinsiy aloqa orqali yuqadigan virusli infeksiya bilan zararlanishi tibbiyotda gepatit C deb ataladi. Qo`zg`atuvchisi Flaviviridae oilasiga mansub hujayrali bo`lmagan yuqumli kasalliklarning RNK o`z ichiga olgan virusidir. Infektsiya uzoq vaqt davomida o'zini ko'rsatmasdan tanada qolishi mumkin. Shuning uchun faqat PCR RNK RNK yordamida qon testi yordamida mikroorganizm aniqlanganda gepatit C (tashxis sifatida) asosli hisoblanadi.
Flavivirus sun'iy ravishda o'stirilgan izolyatsiya qilingan hujayralarda ishlab chiqarilmaydi. Ko'payish jarayonida yuqumli agent immunologik jihatdan aniq modifikatsiyalarni yaratadi. Bu omillar tananing berishga to'sqinlik qiladiTegishli himoya choralari va mutaxassislar samarali vaktsina yaratishda qiynalmoqda.
Virus parenteral yoʻl bilan yuqadi. INFEKTSION uchun u to'g'ridan-to'g'ri qon oqimiga etarli miqdorda kirishi kerak.
Gepatit C uchun qanday testlar o'tkaziladi
Jigarning virusli patologiyalari laboratoriya tekshiruvlari yordamida aniqlanadi. Gepatit C ning klinik tadqiqotlari bemorning biomaterialidagi, asosan qondagi begona va xavfli antijenler yoki oqsil birikmalarini (antikorlarni) o'rganish orqali amalga oshiriladi.
- Enzimatik immunoassay (ELISA). Usul qonda lgM antikorlarini aniqlashga asoslangan. Immunoglobulin eng katta hisoblanadi va pentamer hisoblanadi. Bu limfotsitlarning noma'lum begona moddaga birlamchi himoya reaktsiyasida namoyon bo'ladi.
- Radioimmunoassay (RIA) - yodning belgilangan radioaktiv izotopi yordamida lgM immunoglobulin miqdorini aniqlash.
- Gepatit C ning PCR - biomaterialda (qonda) virusli RNKni aniqlash. Ushbu tahlil tashxisni ishonchli tasdiqlaydi.
IgG testi ishonchli emas. Uning qon zardobida mavjudligi nafaqat flavivirus mavjudligini, balki xuddi shu patogenga ega bo'lgan boshqa o'tmishdagi infektsiyani ham ko'rsatishi mumkin.
PCR tahlilini nima aniqlaydi
Polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PCR) tadqiqot uchun material namunalarida (epiteliya, qon) ma'lum patogenlarga xos DNK hududlarini aniqlashga asoslangan. Tahlil biologik materialdagi RNK yoki DNKni aniqlash orqali patogen eng kichik organizmlarni (viruslarni) aniqlash imkonini beradi.
Antitellarni aniqlashning laboratoriya usuli Gepatit C PCR 3 bosqichda amalga oshiriladi:
- Tanlash. O'rganilayotgan biomaterial aralashmalardan tozalanadi va DNK xromatografik ustunning mobil fazasida olinadi.
- Amplifikasiya. Tahlil qurilma-termostat siklida amalga oshiriladi. U probirkalarni ma'lum bir sikllik bilan isitadi va sovutadi. Bitta tadqiqot uchun 35 tsiklgacha bajariladi. Natijada patogenni aniqlash, aniqlash va baholash uchun etarli miqdordagi DNK fragmentlari mavjud.
- Elektroforez. Olingan bo'laklar agarozning har xil to'yinganligi bilan jelga joylashtiriladi va elektroforez amalga oshiriladi. Olingan elektroferogramma kompyuterda tahlil qilinadi.
Nafaqat standart PCR tadqiqoti, balki Real Time PCR tahlili ham qo'llaniladi. Bu real vaqt diagnostikasi. Usul sifat va miqdoriy tahlil qilish imkonini beradi, bu kasallikning shakllanishi va dinamikasini aniqlash imkonini beradi, shuningdek, patologiyaning kelib chiqish sababini bartaraf etishga qaratilgan terapiyani tayinlaydi. Haqiqiy vaqtda PCR infektsion agentlarning sof madaniyatini aniqlash uchun ham qo'llaniladi (genotiplash).
Polimeraza zanjiri reaktsiyasi sinovi qanday amalga oshiriladi
Tashxis uchun insonning har qanday biologik suyuqligidan foydalanish mumkin. Gepatit C tekshiruvi uchun biomaterial odatda qon hisoblanadi.
Diagnostika uchun namuna olish protsessual tartibda amalga oshiriladiidora. Qon olish uchun qon ivishini inhibe qiluvchi moddaga ega bir martalik sinov naychalaridan foydalaning. Yuqumli qo'zg'atuvchilar tarqalishining oldini olishga qaratilgan tadbirlar tashqaridan mikroorganizmlarning boshqa shtammi kirib kelishining oldini olishga yordam beradi.
Gepatit C PCR uchun qon ertalab och qoringa olinadi. Namuna darhol laboratoriyaga yuboriladi. Biomaterialni +4 dan +8 darajagacha bo'lgan haroratda saqlashga ruxsat beriladi. Konteynerlar etiketlanadi va ko'rsatmalar bilan ta'minlanadi. Sinov natijalari 48 soat ichida, baʼzan esa tezroq chiqadi.
PCR turlari
Polimeraza zanjiri reaksiyasini qoʻllash doirasi ancha keng. Infeksionistlar PCR yordamida gepatit B, qon so'ruvchi hasharotlar tomonidan yuqadigan kasalliklar, OITS, sil kasalligini aniqlaydilar. Onkologiyada bu usul yordamida o'simta hujayralari erta bosqichda aniqlanadi.
Taxminan oʻn toʻrtta tahlil turi mavjud. Bir yoki boshqa turlardan foydalanish tahlillarning ko'lami va yakuniy natijalariga bog'liq. Natija 20 daqiqa ichida kerak bo'lganda PCRning ayrim turlari ajralmas hisoblanadi.
Gepatit C diagnostikasi uchun polimeraza zanjiri reaktsiyasining 3 turi qo'llaniladi:
- Sifatli baholash tanada infektsiya mavjudligini ko'rsatuvchi ijobiy yoki flavivirus yo'qligini ko'rsatuvchi salbiy bo'lishi mumkin.
- Real-vaqtdagi PCR (miqdoriy tahlil) - IU/ml da patogenning miqdoriy RNKsini aniqlaydi.
- Genotiplash - bu virus turini (genotipini) aniqlaydigan tahlil.
To'g'ri aniqlash va kasallikni aniqlash uchun, keyinOptimal terapiyani tayinlash uchun barcha uch turdagi tadqiqotlardan foydalaniladi.
Sifatli polimeraza zanjiri reaktsiyasi tahlili
HCV ga antikorlarni aniqlagan ELISA ga ega bo'lgan har bir kishi uchun tahlil majburiydir. Gepatit C uchun sifatli PCR standart sezuvchanlik testidir. Usul faqat aniqlashga qaratilgan, boshqa moddalarni sanash yoki ajratish amalga oshirilmaydi.
Antikorlarni aniqlash uchun sezgirlik chegarasi kamida 50 IU/ml bo'lgan maxsus test tizimlari qo'llaniladi. Agar antikorlar aniqlansa, boshqa aniqlovchi testlar buyuriladi. Natija salbiy bo'lsa, boshqa test o'tkazilmaydi.
Ba'zi hollarda noto'g'ri salbiy natija laboratoriya xodimlarining malakasizligi yoki sifatsiz reagentlar tufayli bo'lishi mumkin. Sug'urta uchun tahlilni boshqa joyda qaytadan o'tkazgan ma'qul.
Miqdoriy PCR
Usul bitta reaksiya siklidagi flaviviruslar sonini bevosita oʻrganish uchun ishlatiladi. To'g'ri o'lchash uchun gibridizatsiya uchun ishlatiladigan DNK fragmentlari yoki floresan etiketli primerlar ishlatiladi. SYBL Yashil bo'yoq yordamida iqtisodiy aniqlash opsiyasi mavjud. Bo'yoq DNKdagi kichik chuqurchaga o'raladi va lazer bilan nurlantirilganda ko'k rangga aylanadi.
Konsentratsiya apparat-kuchaytirgich tomonidan raqamli ekvivalentda aniqlanadi. Qiymatlar laboratoriyalarda biroz farq qilishi mumkin va shuning uchun ularni mos yozuvlar qiymatlari bilan solishtirish kerak.
Miqdoriy PCRgepatit C dorilarning optimal dozasini tanlashga va terapiya davomiyligini aniqlashga yordam beradi. Tadqiqotning chastotasi kasallikning bosqichiga, genotip turiga va belgilangan davolash kursiga bog'liq.
Genotipni aniqlash
Gepatit C virusi o'zgaruvchan genetik tarkibga ega. Ko'pgina modifikatsiyalar vaktsinani yaratishni imkonsiz qiladi, shuningdek terapiyani murakkablashtiradi. Jami 11 ta genotip va 100 ta subtip aniqlangan va qayd etilgan. Sobiq SSSR mamlakatlarida gepatit C bilan kasallangan odamlarda PCR asosan 1b va 3 genotiplarini aniqlaydi.
Har qanday genotip mavjud bo'lsa, siroz yoki jigar saratoni quvnoq bo'lishi mumkin. Shuning uchun virusni vaqtida aniqlash juda muhim.
Ba'zi bemorlar uchun HCV bilan kurashish uchun mo'ljallangan ba'zi dorilar zaharli hisoblanadi. Genotiplash sizga oqsil turini aniqlash va samarali dori buyurish imkonini beradi.
Tirish testlari natijalarida virus genotipini ko'rsatuvchi kichik lotin harfi bilan raqam mavjud. Agar HCV aniqlansa, lekin yozilmagan bo'lsa, bu odamda ma'lum bir geografik hudud uchun xos bo'lmagan genotip borligini bildiradi.
Tahlil natijalari
Natijalarni shifrlash bilan shifokor shug'ullanadi. Faqat bir nechta tadqiqotlar ma'lumotlari (anamnez va tekshirish bilan birga) kasallik tarixi haqida umumiy haqiqiy tasavvurni berishi mumkin.
- Sog'lom odamda biomaterialda sifatli reaksiya uchun test hech narsani aniqlamaydi. Agar "aniqlangan" qiymati ko'rsatilgan bo'lsa, infektsiya tasdiqlanadi va bemorqo'shimcha tashxis qo'yish va davolash kerak.
- Yuqumli qo'zg'atuvchilar sonini aniqlash organizmga virus yukini baholash imkonini beradi. Odatda gepatit C miqdoriy PCR patogenni aniqlamaydi. 810 ^ 5 gacha bo'lgan ko'rsatkich past yuk sifatida qabul qilinadi va to'g'ri terapiya bilan ijobiy natijani kafolatlaydi. Yuqori qiymatlar chuqur tekshirish va uzoq muddatli terapiyani belgilashni talab qiladi, ijobiy natijaga hech kim kafolat bera olmaydi.
- Ijobiy genotiplash natijalari qaysi genotip tan olinganligini ko'rsatadi. Salbiy natija flavivirusning yoʻqligini yoki bu hududga xos boʻlmagan genotip mavjudligini koʻrsatadi.
Pozitiv PCR testi nimani ko'rsatadi
Har qanday jiddiy kasallik keng qamrovli tashxisni talab qiladi. Ijobiy gepatit C PCR tashxisni tasdiqlaydi, ammo bashorat faqat qo'shimcha laboratoriya va instrumental tadqiqotlardan so'ng amalga oshirilishi mumkin.
Virusni aniqlash patologiya haqida toʻliq maʼlumot bermaydi. Uning turini va tabiatini aniqlash, jigar va boshqa organlarga qanday ta'sir qilishini aniqlash kerak. HCV ni erta aniqlash ko'pincha ijobiy terapevtik natija beradi.
Ijobiy ELISA bilan salbiy PCR
Jigarning shikastlanishiga xos belgilar kuzatilganda, infektsiya allaqachon tanaga kirgan bo'lish ehtimoli yuqori. Shuning uchun siz gepatolog yoki yuqumli kasallik bo'yicha mutaxassis bilan bog'lanishingiz kerak. Suhbat davomida mutaxassis anamnez yig'adi va kerakli tekshiruvni tayinlaydi.
Agargepatit C PCR bo'yicha tadqiqotlar natijalari salbiy va ferment immunoassay ijobiy, bu qonda flavivirusga antikorlarning mavjudligini ko'rsatadi. Bu odatda infektsiya tanaga oz miqdorda kirganda sodir bo'ladi, shuning uchun immunitet tizimi u bilan o'z-o'zidan kurashdi. Ammo bunday odamlar hali ham infektsiyalangan deb hisoblanadi va har 6 oyda bir marta tekshirilishi kerak. Agar bunday test natijalari bilan odam bepul tibbiy ko'rikdan o'tishdan bosh tortsa, sog'lig'ini saqlash uchun pul evaziga PCR o'tkazgan ma'qul va natijalar ijobiy bo'lsa, tashxis va davolash uchun mutaxassis bilan bog'laning.
Usulning afzalliklari va kamchiliklari
Gepatit C tashxisini qo'yishda PCR bir qator afzalliklarga ega:
- Patogenni erta aniqlash.
- Virusning aniq ta'rifi.
- Diagnostika samaradorligi.
- Minimal xatolik darajasi.
- Yuqori sezuvchanlik.
Usulning kamchiliklari:
- Tahlilning yuqori narxi. Sinov qimmat uskunalar, reagentlar va yuqori malakali tibbiy xodimlarni talab qiladi. Hammasi jamlanganda katta miqdorni tashkil qiladi.
- Biomaterialni tashish uchun qat'iy talablar.
Jigar yallig'lanishini davolash
Gepatit C virusi uchun PCR tahlili tashxis uchun asosiy hisoblanadi, ammo aniq emas. Terapiya samarali bo'lishi uchun bir qator qo'shimcha laboratoriya va instrumental tadqiqotlar talab qilinadi. Hammasini o'tgandan keyindiagnostik choralar shifokor davolashni buyuradi:
- Diyet №5 belgilangan.
- Alkogol butunlay chiqarib tashlangan.
- 25 kun davomida Interferon va Ribavirinni birgalikda qabul qilish.
- "Essentiale", "Karsil", "Fosfogliv" gepaprotektorlari kurslari.
- Maxsus hollarda diskret plazmaferez qo'llaniladi.
Gepatolog tomonidan ko'rsatilgan dori-darmonlar muntazam ravishda, dozani o'zgartirmasdan qo'llaniladi. Dori-darmonlarni qabul qilish muddati shifokor tomonidan nazorat sinovlaridan o'tgandan keyin belgilanadi. Terapiya kursini tugatgandan so'ng, har olti oyda bir marta shifokorga tashrif buyurishingiz kerak.
PCR-diagnostika gepatit C qo'zg'atuvchisini erta bosqichda aniqlash imkonini beradi. Bu terapiya samaradorligini oshirishga va kasallikning siroz va gepatotsellyulyar karsinoma kabi xavfli shakllariga o'tishining oldini olishga yordam beradi.