Bakteriyalarni o'rganish odamlar uchun katta amaliy ahamiyatga ega. Hozirgi kunga qadar bir-biridan patogenligi, tarqalish maydoni, shakli, o'lchami, flagella soni va boshqa ko'rsatkichlari bilan farq qiluvchi ko'plab prokariotlar kashf etilgan. Ushbu shtammni batafsil o'rganish uchun bakteriologik tadqiqot usuli qo'llaniladi.
Bakteriya hujayralarini tahlil qilish usullari qanday?
Bakteriyalarning patogenligini aniqlash uchun kultura turli usullar bilan tekshiriladi. Ular orasida:
1. Bakterioskopik usul.
2. Bakteriologik usul.
3. Biologik usul.
Bakterioskopik va bakteriologik tadqiqot usullari bevosita prokaryotik hujayralar bilan ishlashga asoslanadi, bunda bunday hujayralarning eksperimental hayvonlarning tirik organizmiga ta'sirini o'rganish uchun biologik tahlil zarur. Kasallikning ma'lum belgilarining namoyon bo'lish darajasiga ko'ra, olim buni amalga oshirishi mumkinnamunada patogen bakteriyalar mavjudligi yoki yo'qligi to'g'risidagi xulosa, shuningdek, ularning madaniyatini olish va boshqa ishlarda foydalanish uchun ularni hayvonning tanasida tabiiy ravishda ko'paytirish.
Tadqiqotning bakteriologik usuli bakterioskopikdan farq qiladi. Birinchisida tahlil qilish uchun tirik prokariotlarning maxsus tayyorlangan kulturasidan foydalaniladi, ikkinchisida esa shisha slaydda o'lik yoki tirik hujayralar bilan ish olib boriladi.
Bakteriologik tadqiqot usulining bosqichlari. Mikrobiologiya
Bakteriya madaniyatining xususiyatlarini o'rganish printsipi prokaryotik hujayralarni o'rganish maqsadini qo'ygan mikrobiologlar uchun ham, bakteriyaning patogen yoki patogen emasligini aniqlash vazifasi bo'lgan laboratoriya texniklari uchun ham foydali bo'lishi mumkin. keyin bemorga tashxis qo'ying.
Bakteriyalarni o'rganish usuli uch bosqichga bo'linadi:
1. Asl namunadan bakteriyalarni ajratish.
2. Bakteriyalarni ekish va sof madaniyatni etishtirish, uning xususiyatlarini o'rganish.
3. Bakteriya hujayralarini batafsil o'rganish.
Birinchi bosqich
Namuna yoki smear muhitning erkin yuzasidan yoki bemordan olinadi. Shunday qilib, biz ozuqaviy muhitga sepilishi kerak bo'lgan ko'plab turdagi bakteriyalarning "mexnatini" olamiz. Ba'zan organizmda tarqalish o'choqlarini bilib, kerakli bakteriyalarni darhol ajratib olish mumkin bo'ladi.
Ikki yoki uch kundan keyin kerakli koloniyalar tanlanadi vaPetri idishlarining qattiq muhitiga steril halqa yordamida ekiladi. Ko'pgina laboratoriyalar qattiq yoki suyuq oziq moddalarni o'z ichiga olishi mumkin bo'lgan sinov naychalari bilan ishlaydi. Mikrobiologiyada bakteriologik tadqiqot usuli shunday amalga oshiriladi.
Ikkinchi bosqich
Bakteriyalarning alohida koloniyalari olingandan so'ng to'g'ridan-to'g'ri makro va mikrotahlil o'tkaziladi. Koloniyalarning barcha parametrlari o'lchanadi, ularning har birining rangi va shakli aniqlanadi. Petri idishida, keyin esa boshlang'ich materialda koloniyalarni sanash odatiy hol emas. Bu patogen bakteriyalarni tahlil qilishda muhim ahamiyatga ega, ularning soni kasallikning darajasiga bog'liq.
Tadqiqotning bakteriologik usuli, uning 2-bosqichi mikroorganizmlarning alohida koloniyalarini oʻrganishdan iborat boʻlib, bakteriyalarni tahlil qilishning biologik usuli bilan bogʻlanishi mumkin. Ushbu bosqichda ishlashning yana bir maqsadi - manba materialining miqdorini oshirishdir. Buni ozuqaviy muhitda qilish mumkin yoki tirik eksperimental organizmlar ustida in vivo tajriba o'tkazish mumkin. Patogen bakteriyalar ko'payadi va natijada qonda millionlab prokaryotik hujayralar bo'ladi. Olingan qondan bakteriyalarning kerakli ishchi materialini tayyorlash oson.
Uchinchi bosqich
Tadqiqotning eng muhim qismi bakterial madaniyatning morfologik, biokimyoviy, toksikogen va antigen xususiyatlarini aniqlashdir. Ish ozuqaviy muhitda oldindan tozalangan kulturalar, shuningdek mikroskop ostida preparatlar (ko'pincha bo'yalgan) bilan amalga oshiriladi.
Egalikni belgilangpatogen yoki opportunistik bakteriyalarni u yoki bu tizimli guruhga, shuningdek, ularning dori vositalariga chidamliligini aniqlash bakteriologik tadqiqot usuliga imkon beradi. 3-bosqich - antibiotiklar, ya'ni atrof-muhitdagi dorilarning tarkibi sharoitida bakterial hujayralarning xatti-harakatlarini tahlil qilish.
Madaniyatning antibiotiklarga chidamliligini o'rganish muayyan bemor uchun zarur, eng muhimi, samarali dori vositalarini buyurish zarur bo'lganda katta amaliy ahamiyatga ega. Bunda bakteriologik tadqiqot usuli yordam berishi mumkin.
O'sish muhiti nima?
Rivojlanish va koʻpayish uchun bakteriyalar oldindan tayyorlangan ozuqa muhitida boʻlishi kerak. Konsistensiyaga ko'ra ular suyuq yoki qattiq, kelib chiqishi bo'yicha esa o'simlik yoki hayvon bo'lishi mumkin.
Asosiy media talablari:
1. Sterillik.
2. Maksimal shaffoflik.
3. Kislotalik, osmotik bosim, suv faolligi va boshqa biologik qiymatlarning optimal ko'rsatkichlari.
Izolyatsiya qilingan koloniyalarni olish
1. Drygalskiy usuli. Bu bakterial halqaga har xil turdagi mikroorganizmlar bilan smear qo'llanilishidan iborat. Bu halqa birinchi Petri kosasi bo'ylab ozuqaviy muhit bilan o'tkaziladi. Bundan tashqari, pastadirni o'zgartirmasdan, qoldiq material usuli ikkinchi va uchinchi Petri idishlarida amalga oshiriladi. Shunday qilib, koloniyaning oxirgi namunalarida bakteriyalar juda zich ekilmaydi va shu bilan ish uchun zarur bo'lganlarni topish qobiliyatini soddalashtiradi.bakteriyalar.
2. Koch usuli. U eritilgan ozuqa muhiti bo'lgan probirkalardan foydalanadi. U erda bakteriya surtmasi bo'lgan halqa yoki pipetka qo'yiladi, shundan so'ng probirkaning tarkibi maxsus plastinkaga quyiladi. Agar (yoki jelatin) biroz vaqt o'tgach qotib qoladi va uning qalinligida kerakli hujayra koloniyalarini topish oson. Mikroorganizmlar kontsentratsiyasi juda yuqori bo'lmasligi uchun ishni boshlashdan oldin probirkalardagi bakteriyalar aralashmasini suyultirish muhim.
Tadqiqotning bakteriologik usuli, uning bosqichlari kerakli bakteriyalar madaniyatini ajratib olishga asoslangan, izolyatsiya qilingan koloniyalarni topishning ushbu ikki usulisiz amalga oshirilmaydi.
Antibiogram
Vizual ravishda bakteriyalarning dorilarga reaktsiyasini ikki amaliy usulda ko'rish mumkin:
1. Qog'oz disk usuli.
2. Suyuq muhitda bakteriya va antibiotikni ko'paytirish.
Qog'oz disk usuli qattiq ozuqa muhitida o'stirilgan mikroorganizmlar madaniyatini talab qiladi. Bunday muhitga antibiotiklar bilan namlangan bir necha dumaloq qog'oz qo'ying. Agar preparat bakterial hujayralarni zararsizlantirish bilan muvaffaqiyatli kurashsa, bunday davolashdan so'ng koloniyalardan mahrum bo'lgan hudud bo'ladi. Agar antibiotikga reaktsiya salbiy bo'lsa, bakteriyalar omon qoladi.
Suyuq ozuqa muhitidan foydalanilganda, avvalo turli xil suyultirilgan bakteriyalar kulturasi bilan bir nechta probirkalar tayyorlang. Ushbu probirkalarga antibiotiklar qo'shiladi va kun davomida modda va mikroorganizmlarning o'zaro ta'sir qilish jarayoni kuzatiladi. Natijada, yuqori sifatli antibiogramma olinadi, unga ko'ra buni qilish mumkinma'lum bir hosil uchun preparatning samaradorligini baholang.
Tahlilning asosiy vazifalari
Bu yerda bakteriologik tadqiqot usulining maqsadi va bosqichlari keltirilgan.
1. Bakterial koloniyalarni ajratish uchun ishlatiladigan boshlang'ich materialni oling. Bu har qanday ob'ekt yuzasidan, shilliq qavat yoki inson organining bo'shlig'idan olingan surtma, qon tekshiruvi bo'lishi mumkin.
2. Madaniyatni qattiq ozuqaviy muhitda etishtirish. 24-48 soatdan keyin Petri idishida har xil turdagi bakteriyalar koloniyalarini topish mumkin. Biz morfologik va/yoki biokimyoviy mezonlarga ko'ra keraklisini tanlaymiz va u bilan keyingi ishlarni amalga oshiramiz.
3. Olingan madaniyatni targ'ib qilish. Bakteriologik tadqiqot usuli bakterial madaniyatlar sonini ko'paytirishning mexanik yoki biologik usuliga asoslangan bo'lishi mumkin. Birinchi holda, ish qattiq yoki suyuq ozuqa vositalari bilan amalga oshiriladi, ularda bakteriyalar termostatda ko'payadi va yangi koloniyalar hosil qiladi. Biologik usul bakteriyalar sonini ko'paytirish uchun tabiiy sharoitlarni talab qiladi, shuning uchun bu erda eksperimental hayvon mikroorganizmlar bilan kasallanadi. Bir necha kundan keyin qon namunasida yoki smetada ko'plab prokaryotlar topilishi mumkin.
4. Tozalangan madaniyat bilan ishlash. Bakteriyalarning tizimli holatini, shuningdek ularning patogenlarga tegishliligini aniqlash uchun hujayralarni morfologik va biokimyoviy xususiyatlarga ko'ra to'liq tahlil qilish kerak. Mikroorganizmlarning patogen guruhlarini o'rganishda bilish muhimdirantibiotiklar qanchalik samarali.
Bu bakteriologik tadqiqot usulining umumiy xarakteristikasi edi.
Tahlil xususiyatlari
Bakteriologik tadqiqotning asosiy qoidasi maksimal sterillikdir. Agar siz probirkalar bilan ishlayotgan bo'lsangiz, bakteriyalar kulturalari va subkulturalari faqat qizdirilgan spirtli chiroqda o'tkazilishi kerak.
Bakteriologik tadqiqot usulining barcha bosqichlari maxsus halqa yoki Paster pipetkasidan foydalanishni talab qiladi. Ikkala vositani ham spirtli chiroq olovida oldindan davolash kerak. Pasteur pipetkasiga kelsak, bu erda termal sterilizatsiyadan oldin pipetkaning uchini pinset bilan sindirish kerak.
Bakteriyalarni ekish texnikasi ham o'ziga xos xususiyatlarga ega. Birinchidan, qattiq muhitda emlash paytida agar yuzasida bakterial halqa o'tkaziladi. Loop, albatta, allaqachon sirtda mikroorganizmlar namunasiga ega bo'lishi kerak. Madaniy muhitga emlash ham qo'llaniladi, bu holda halqa yoki pipetka Petri idishining pastki qismiga etib borishi kerak.
Suyuq muhit bilan ishlaganda probirkalardan foydalaniladi. Bu erda suyuqliklar laboratoriya idishlari yoki tiqinlar chetiga tegmasligiga, ishlatiladigan asboblar (pipetka, halqa) begona narsalar va sirtlarga tegmasligiga ishonch hosil qilish muhimdir.
Biologik tadqiqot usulining ahamiyati
Bakteriya namunalarini tahlil qilish oʻzining amaliy qoʻllanilishiga ega. Eng avvalotibbiyotda bakteriologik tadqiqot usulidan foydalanish mumkin. Masalan, to'g'ri tashxis qo'yish, shuningdek, to'g'ri davolash kursini ishlab chiqish uchun bemorning mikroflorasini o'rganish kerak. Antibiogramma bu erda yordam beradi, bu patogenga qarshi dorilarning faolligini ko'rsatadi.
Bakteriyalarni tahlil qilish laboratoriyada sil, qaytalanuvchi isitma yoki gonoreya kabi xavfli kasalliklarni aniqlash uchun ishlatiladi. Bundan tashqari, bodomsimon bezlar, organlar bo'shliqlarining bakterial tarkibini o'rganish uchun ishlatiladi.
Atrof-muhitning ifloslanishini aniqlash uchun bakteriologik tadqiqot usulidan foydalanish mumkin. Ob'ekt yuzasidan smearning miqdoriy va sifat tarkibi to'g'risidagi ma'lumotlarga ko'ra, ushbu muhitning mikroorganizmlar tomonidan populyatsiya darajasi aniqlanadi.
