Deyarli barcha yuqumli kasalliklarning laboratoriya diagnostikasi serologik reaksiyalar usullari bilan bemor qonida qoʻzgʻatuvchining antigenlariga qarshi hosil boʻlgan antitelolarni aniqlashga asoslangan. Ular tibbiy amaliyotga XIX asr oxiridan 20-asr boshlarida kirib kelgan.
Fan taraqqiyoti mikroblarning antigen tuzilishini va ularning toksinlarining kimyoviy formulalarini aniqlashga yordam berdi. Bu nafaqat terapevtik, balki diagnostik sarumlarni ham yaratish imkonini berdi. Ular laboratoriya hayvonlariga zaiflashtirilgan patogenlarni yuborish orqali olinadi. Bir necha kunlik ta'sir qilishdan so'ng quyon yoki sichqonlarning qoni serologik testlar yordamida mikroblarni yoki ularning toksinlarini aniqlash uchun ishlatiladigan preparatlarni tayyorlash uchun ishlatiladi.
Bunday reaktsiyaning tashqi ko'rinishi uning paydo bo'lish shartlariga va bemorning qonidagi antijenlarning holatiga bog'liq. Agar mikrob zarralari erimaydigan bo'lsa, ular zardobda cho'kadi, parchalanadi, bog'lanadi yoki harakatsizlanadi. Agar antijenler eriydigan bo'lsa, neytrallanish yoki cho'kma hodisasi paydo bo'ladi.
Agglyutinatsiya reaktsiyasi (RA)
Serologik aglutinatsiya testi juda o'ziga xosdir. Buni bajarish oson va juda qulayingl., bemorning qon zardobida antijenler mavjudligini tezda aniqlash. U Vidal reaktsiyasini (tif va paratif isitmasi tashxisi) va Weigl (tif isitmasi) tekshirish uchun ishlatiladi.
U inson antikorlari (yoki aglyutininlar) va mikrob hujayralari (aglutenogenlar) o'rtasidagi o'ziga xos o'zaro ta'sirga asoslangan. Ularning o'zaro ta'siridan keyin cho'kma hosil bo'ladigan zarralar hosil bo'ladi. Bu ijobiy belgi. Reaksiyani o‘rnatish uchun tirik yoki o‘ldirilgan mikroblar, zamburug‘lar, protozoa, qon hujayralari va somatik hujayralardan foydalanish mumkin.
Kimyoviy jihatdan reaksiya ikki bosqichga bo'linadi:
- Antikorlarning (AT) antijenler (AG) bilan o'ziga xos aloqasi.
- Spesifik bo'lmagan - AG-AT konglomeratlarining cho'kishi, ya'ni aglyutinat hosil bo'lishi.
Bilvosita aglutinatsiya reaktsiyasi (IPHA)
Bu reaktsiya avvalgisiga qaraganda sezgirroq. U bakteriyalar, hujayra ichidagi parazitlar va protozoyalar keltirib chiqaradigan kasalliklarni aniqlash uchun ishlatiladi. Bu shunchalik o'ziga xoski, hatto juda past konsentratsiyali antikorlarni ham aniqlash mumkin.
Tozalangan qo'y eritrotsitlari va antikorlar yoki antijenler bilan oldindan ishlangan inson qizil qon tanachalari uni ishlab chiqarish uchun ishlatiladi (laborator nimani topmoqchi bo'lganiga qarab). Ba'zi hollarda inson qizil qon hujayralari immunoglobulinlar bilan davolanadi. Eritrositlarning serologik reaktsiyalari, agar ular nay tubiga joylashsa, sodir bo'lgan deb hisoblanadi. Ijobiy reaktsiya haqidahujayralar butun pastki qismini egallagan teskari soyabon shaklida joylashganida ayting. Agar eritrotsitlar ustunga yoki pastki qismning o'rtasiga tugma shaklida joylashsa, salbiy reaktsiya hisoblanadi.
Yoʻgʻir reaksiyasi (RP)
Ushbu turdagi serologik reaksiyalar antijenlarning juda kichik zarralarini aniqlash uchun ishlatiladi. Bular, masalan, oqsillar (yoki ularning qismlari), oqsillarning lipidlar yoki uglevodlar bilan birikmalari, bakteriyalar qismlari, ularning toksinlari bo'lishi mumkin.
Reaksiya uchun sarumlar hayvonlarni, odatda quyonlarni sun'iy ravishda yuqtirish orqali olinadi. Ushbu usul bilan siz mutlaqo har qanday cho'ktiruvchi sarumni olishingiz mumkin. Serologik presipitatsiya reaktsiyalarining paydo bo'lishi ta'sir mexanizmi bo'yicha aglyutinatsiya reaktsiyalariga o'xshaydi. Qon zardobidagi antikorlar kolloid eritmada antijenler bilan birlashib, trubaning pastki qismida yoki substratda (jel) yotqizilgan katta oqsil molekulalarini hosil qiladi. Bu usul juda oʻziga xos hisoblanadi va hatto arzimas miqdorda moddani aniqlay oladi.
Vabo, tulyaremiya, kuydirgi, meningit va boshqa kasalliklarni tashxislash uchun ishlatiladi. Bundan tashqari, u sud-tibbiy ekspertizasiga jalb qilingan.
Gel cho'kma reaktsiyasi
Serologik reaksiyalar nafaqat suyuq muhitda, balki agar-gelda ham amalga oshirilishi mumkin. Bu diffuz yog'ingarchilik usuli deb ataladi. Uning yordami bilan murakkab antigen aralashmalarning tarkibi o'rganiladi. Bu usul antijenlarni antikorlarga va aksincha xemotaksisga asoslangan. Jel ichida ular harakatlanadihar xil tezlikda bir-biriga qarab yoʻnalgan holda yogʻingarchilik chiziqlarini hosil qiladi. Har bir qator bitta AG-AT toʻplamidir.
Antitoksin (PH) bilan ekzotoksinni neytrallash reaksiyasi
Antitoksik sarumlar mikroorganizmlar tomonidan ishlab chiqariladigan ekzotoksin ta'sirini zararsizlantirishga qodir. Bu serologik reaksiyalar shunga asoslanadi. Mikrobiologiya bu usuldan qon zardobi, toksinlar va zaharli moddalarni titrlash va ularning terapevtik faolligini aniqlash uchun foydalanadi. Toksinni zararsizlantirish kuchi an'anaviy birliklar bilan belgilanadi - AE.
Bundan tashqari, ushbu reaksiya tufayli ekzotoksinning turini yoki turini aniqlash mumkin. Bu tetanoz, difteriya, botulizm tashxisida qo'llaniladi. Tadqiqot ham "shishada" ham, jelda ham o'tkazilishi mumkin.
Lizis reaktsiyasi (RL)
Bemor organizmiga kiradigan immun zardob o'zining asosiy vazifasi passiv immunitetdan tashqari, lizing xususiyatiga ham ega. U bemorning tanasiga kiradigan mikrobial agentlarni, hujayrali begona elementlarni va viruslarni eritishga qodir. Sarum tarkibiga kiradigan antikorlarning o'ziga xosligiga qarab, bakteriolizinlar, sitolizinlar, spiroxetolizinlar, gemolizinlar va boshqalar ajratiladi.
Ushbu maxsus antikorlar "komplement" deb ataladi. U inson tanasining deyarli barcha suyuqliklarida mavjud, murakkab protein tuzilishiga ega va harorat ko'tarilishi, silkinish, kislotalar va to'g'ridan-to'g'ri quyosh nuriga juda sezgir. Ammo quritilgan holatda u saqlanishi mumkinuning lizing xususiyatlari olti oygacha.
Ushbu turdagi serologik reaksiyalar mavjud:
- bakterioliz;
- gemoliz.
Bakterioliz bemorning qon zardobi va tirik mikroblar bilan maxsus immun zardobi yordamida amalga oshiriladi. Agar qonda yetarlicha komplement mavjud boʻlsa, tadqiqotchi bakteriyalar lizisini koʻradi va reaksiya ijobiy hisoblanadi.
Qonning ikkinchi serologik reaktsiyasi shundan iboratki, bemorning qizil qon hujayralari suspenziyasi faqat ma'lum bir iltifot mavjudligida faollashtirilgan gemolizinlarni o'z ichiga olgan sarum bilan davolanadi. Agar mavjud bo'lsa, u holda laborant qizil qon hujayralarining erishini kuzatadi. Bu reaksiya zamonaviy tibbiyotda qon zardobidagi komplement titrini (ya’ni uning eritrotsitlar lizisini qo‘zg‘atuvchi eng kichik miqdorini) aniqlash va komplement fiksatsiyasi uchun tahlil o‘tkazish uchun keng qo‘llaniladi. Aynan shu tarzda sifilis uchun serologik test o'tkaziladi - Vasserman reaktsiyasi.
Komplement fiksatsiya reaktsiyasi (CFR)
Ushbu reaksiya bemorning qon zardobida yuqumli agentga antikorlarni aniqlash, shuningdek patogenni uning antijenik tuzilishiga qarab aniqlash uchun ishlatiladi.
Shu paytgacha biz oddiy serologik reaksiyalarni tasvirlab berdik. RSK murakkab reaktsiya hisoblanadi, chunki unda ikkita emas, balki uchta element o'zaro ta'sir qiladi: antikor, antigen va komplement. Uning mohiyati antikor va antigen o'rtasidagi o'zaro ta'sirdadirfaqat hosil bo'lgan AG-AT kompleksi yuzasida adsorbsiyalangan komplement oqsillari ishtirokida paydo bo'ladi.
Antigenlarning o'zi komplement qo'shilgandan so'ng sezilarli o'zgarishlarga uchraydi, bu reaktsiya sifatini ko'rsatadi. Bu lizis, gemoliz, immobilizatsiya, bakteritsid yoki bakteriostatik ta'sir bo'lishi mumkin.
Reaksiyaning oʻzi ikki fazada sodir boʻladi:
- Tekshiruvchiga koʻrinmaydigan antigen-antikor kompleksining hosil boʻlishi.
- Komplement ta'sirida antigenning o'zgarishi. Ushbu bosqichni ko'pincha yalang'och ko'z bilan kuzatish mumkin. Agar reaktsiya ko'zga ko'rinmasa, o'zgarishlarni aniqlash uchun qo'shimcha indikator tizimi ishlatiladi.
Ko'rsatkich tizimi
Bu reaksiya komplement fiksatsiyasiga asoslangan. RSC o'rnatilgandan bir soat o'tgach, probirkaga tozalangan qo'chqor eritrotsitlari va komplementsiz gemolitik sarum qo'shiladi. Agar probirkada bog‘lanmagan komplement qolsa, u holda u qo‘y qon hujayralari va gemolizin o‘rtasida hosil bo‘lgan AG-AT kompleksiga qo‘shilib, ularning erishiga olib keladi. Bu RSK salbiy ekanligini anglatadi. Agar eritrotsitlar buzilmagan bo'lsa, demak, reaktsiya ijobiy bo'ladi.
Gemagglyutinatsiya testi (RGA)
Bir-biridan tubdan farq qiladigan ikkita gemagglyutinatsiya reaktsiyasi mavjud. Ulardan biri serologik bo'lib, u qon guruhlarini aniqlash uchun ishlatiladi. Bunday holda, qizil qon tanachalari antikorlar bilan o'zaro ta'sir qiladi.
Va ikkinchisireaktsiya serologik uchun qo'llanilmaydi, chunki qizil qon hujayralari viruslar tomonidan ishlab chiqarilgan gemagglyutininlar bilan reaksiyaga kirishadi. Har bir patogen faqat o'ziga xos eritrotsitlarga (tovuq, qo'zichoq, maymun) ta'sir qilganligi sababli, bu reaktsiyani juda o'ziga xos deb hisoblash mumkin.
Reaksiya ijobiy yoki salbiy ekanligini qon hujayralarining probirkaning pastki qismidagi joylashuviga qarab aniqlashingiz mumkin. Agar ularning naqshlari teskari soyabonga o'xshasa, bemorning qonida kerakli virus mavjud. Va agar barcha eritrotsitlar tanga ustuni kabi shakllangan bo'lsa, unda kerakli patogenlar yo'q.
Gemagglyutinatsiyani inhibe qilish testi (HITA)
Bu bemorning qon zardobida viruslar turi, turi yoki oʻziga xos antikorlar mavjudligini aniqlash imkonini beruvchi oʻta oʻziga xos reaksiya.
Uning mohiyati shundan iboratki, sinov materiali bilan probirkaga qo'shilgan antikorlar eritrotsitlarda antigenlarning cho'kishiga to'sqinlik qiladi va shu bilan gemagglyutinatsiyani to'xtatadi. Bu izlanayotgan o'ziga xos virus uchun qonda o'ziga xos antijenlar mavjudligining sifat belgisidir.
Immunofluoresans reaktsiyasi (RIF)
Reaksiya AG-AT komplekslarini ftorxrom boʻyoqlari bilan ishlov berilgandan keyin lyuminestsent mikroskop yordamida aniqlash qobiliyatiga asoslangan. Ushbu usul bilan ishlash oson, sof madaniyatni izolyatsiya qilishni talab qilmaydi va ozgina vaqt talab etadi. Bu yuqumli kasalliklarni tezkor tashxislash uchun ajralmas hisoblanadi.
Amalda bu serologik reaksiyalar ikki turga bo'linadi: to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita.
Direct RIF dan ishlab chiqariladifloresan sarum bilan oldindan davolanadigan antijen. Va bilvosita, birinchi navbatda preparatni qiziqtiradigan antikorlar uchun antigenlarni o'z ichiga olgan an'anaviy diagnostika bilan davolash qilinadi, so'ngra AG-AT kompleksi oqsillari uchun xos bo'lgan lyuminestsent zardob qayta qo'llaniladi va mikrob hujayralari. mikroskop ostida ko'rinadigan bo'ladi.
